2021.5.21

近日，由檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)網(wǎng)主辦、融智生物承辦的“質(zhì)于精準(zhǔn)，譜在未來(lái)——MALDI-TOF質(zhì)譜能力論壇”于2021 CACLP期間在重慶隆重舉辦。在此次論壇上，中科院生物物理所李巖研究員表示：“MALDI-TOF質(zhì)譜定量的時(shí)代已經(jīng)到來(lái)！”---融智質(zhì)譜使得MALDI-TOF質(zhì)譜用于定量檢測(cè)具備了可能性，最終實(shí)現(xiàn)需要配合方法學(xué)開(kāi)發(fā)。

中科院生物物理所 李巖研究員

李巖研究員在此次論壇上進(jìn)行了題為《MALDI質(zhì)譜在科研與臨床中的應(yīng)用》的主題報(bào)告。

報(bào)告提到，由于MALDI-TOF質(zhì)譜具有設(shè)備簡(jiǎn)單（不與前處理儀器相連接）、高通量、儀器穩(wěn)定、操作與維護(hù)簡(jiǎn)單、譜圖解析簡(jiǎn)單等特點(diǎn)，與ESI源質(zhì)譜相比，更適用于臨床現(xiàn)場(chǎng)快檢，有望成為常規(guī)的檢測(cè)技術(shù)。

然而，也正是由于MALDI-TOF質(zhì)譜儀器的這些特點(diǎn)，導(dǎo)致其靈敏度和分辨率有限，在臨床上大家比較認(rèn)可的一度只有微生物鑒定這一個(gè)定性應(yīng)用，就連最近發(fā)展起來(lái)的核酸檢測(cè)本質(zhì)也是定性應(yīng)用。業(yè)內(nèi)心照不宣地認(rèn)為MALDI-TOF質(zhì)譜用作定量檢測(cè)僅僅是個(gè)噱頭，是不可能實(shí)現(xiàn)的，也正因此它在臨床領(lǐng)域的應(yīng)用非常有限。

這話放到三年前可能是正確的。

現(xiàn)如今，MALDI-TOF質(zhì)譜的國(guó)產(chǎn)化發(fā)展迅速，國(guó)內(nèi)廠家研發(fā)的不少于10家，這其中就包括融智生物。融智生物的特別之處在于實(shí)現(xiàn)了MALDI-TOF質(zhì)譜的第二個(gè)能力——定量。我們可能需要換個(gè)角度看待現(xiàn)在的MALDI-TOF質(zhì)譜了。

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蛋白質(zhì)檢測(cè)是科研領(lǐng)域比較關(guān)心的問(wèn)題，根據(jù)其分子量大小可以分成多肽小蛋白（分子量＜20000Da）和大蛋白（分子量＞20000Da）。臨床相關(guān)的多肽檢驗(yàn)指標(biāo)較少，尤其是作為激素的多肽往往水平非常低，一般為皮克每毫升，常規(guī)方法很難進(jìn)行檢測(cè)。多肽組學(xué)是很好的檢測(cè)生理狀態(tài)的指標(biāo)，如果有好的方法學(xué)，對(duì)于發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)志物做新診斷指標(biāo)研發(fā)非常有用。然而，多肽的分子結(jié)構(gòu)類似，種類很多，對(duì)儀器的分辨率要求比微生物要高很多。

另外，如果要做內(nèi)源性生物標(biāo)志物的分析，特別是血清標(biāo)志物，定量能力是必要的，即使是相對(duì)定量，也需要非常高的定量重復(fù)性，否則得到的結(jié)果并不可靠。

李巖研究員表示，過(guò)去他們?cè)谶@個(gè)方面做的少，主要是因?yàn)樵缙诘腗ALDI-TOF質(zhì)譜儀器對(duì)定量沒(méi)有進(jìn)行優(yōu)化，CV（變異系數(shù)）超過(guò)30%，不可能實(shí)現(xiàn)多肽譜學(xué)研究。現(xiàn)在，融智生物的質(zhì)譜CV可以做到5%以內(nèi)，所以他們開(kāi)始考慮多肽的方法學(xué)研究了。

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圖.在80個(gè)不同靶點(diǎn)采集的80張質(zhì)譜覆蓋圖，糖化與非糖化定量精度達(dá)到~99%，融智生物QuanTOF質(zhì)譜儀。圖片來(lái)源于李巖研究員報(bào)告《MALDI質(zhì)譜在科研與臨床中的應(yīng)用》。

當(dāng)然，MALDI-TOF質(zhì)譜實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)是一個(gè)非常艱難的過(guò)程，它的實(shí)現(xiàn)不是一個(gè)點(diǎn)的突破，是一系列的技術(shù)積累才實(shí)現(xiàn)的結(jié)果。

有了定量能力才能討論MALDI-TOF質(zhì)譜臨床檢驗(yàn)技術(shù)開(kāi)發(fā)。

小分子檢測(cè)是李巖研究員最近更關(guān)心的一方面。由于之前無(wú)法實(shí)現(xiàn)定量，所以MALDI-TOF質(zhì)譜用于小分子定量檢測(cè)的配套方法學(xué)開(kāi)發(fā)比較少，加之血液中的小分子含量水平低，提純困難，在以前這是被認(rèn)為無(wú)法實(shí)現(xiàn)的領(lǐng)域。正因?yàn)镸ALDI-TOF質(zhì)譜有定量能力了，研究人員可以考慮做更多的檢測(cè)方法學(xué)研究了。

據(jù)悉，李巖研究員自從與融智生物接觸以后，一直想做這個(gè)方面的方法學(xué)開(kāi)發(fā)，并于2019年開(kāi)始嘗試，在廣東省設(shè)立了科研項(xiàng)目，目前已經(jīng)發(fā)表類固醇和三油甘脂檢測(cè)相關(guān)的兩篇文章，還對(duì)三油甘脂細(xì)分進(jìn)行了研究。

方法開(kāi)發(fā)出來(lái)，下一步需要考慮的問(wèn)題就是與現(xiàn)有的臨床方法學(xué)比較，有沒(méi)有足夠的優(yōu)勢(shì)，臨床需不需要做到這么精確的程度。無(wú)論如何，不管是科研還是臨檢，都有了一個(gè)新的方向可以去嘗試。

在報(bào)告的最后，李巖研究員對(duì)MALDI-TOF質(zhì)譜的應(yīng)用前景進(jìn)行了總結(jié)：

第一，MALDI-TOF質(zhì)譜更具備臨床現(xiàn)場(chǎng)快檢的可能性，因?yàn)樗鄬?duì)穩(wěn)定，儀器簡(jiǎn)單，很少出故障。
第二，現(xiàn)在的MALDI-TOF質(zhì)譜已經(jīng)具備定量能力了，這是一個(gè)新的方向。
第三，MALDI-TOF質(zhì)譜沒(méi)有專門的前處理儀器，前處理方法學(xué)開(kāi)發(fā)是需要關(guān)注的領(lǐng)域。可以說(shuō)，只要成熟一個(gè)前處理方法學(xué)就會(huì)多一個(gè)臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目。

?“我們的工作就是希望通過(guò)方法學(xué)開(kāi)發(fā)，把更多的科研項(xiàng)目變成臨檢項(xiàng)目，為醫(yī)院服務(wù)，這是我們的目標(biāo)。也希望儀器的發(fā)展能帶動(dòng)整個(gè)應(yīng)用領(lǐng)域的進(jìn)步，”李巖研究員表示。

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（本文整理自中科院生物物理所李巖研究員報(bào)告：《MALDI質(zhì)譜在科研與臨床中的應(yīng)用》）

文章來(lái)源：檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)網(wǎng)

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