2020.05.27
結(jié)核分枝桿菌（M.tuberculosis），俗稱結(jié)核桿菌（tubercle bacillus），是引起結(jié)核病的病原體。1882年由德國(guó)細(xì)菌學(xué)家郭霍（Robert Koch，1843-1910）發(fā)現(xiàn)并證明為人類結(jié)核病的病原菌。該菌感染人體導(dǎo)致的結(jié)核病是嚴(yán)重影響人類生命健康的一種傳染病，經(jīng)過與其幾個(gè)世紀(jì)的抗?fàn)幒笾饾u得到控制，但近年來由于多種因素的影響，該疾病變得日趨嚴(yán)重。
結(jié)核分枝桿菌，圖片來源于：百度百科
基于QuanID微生物質(zhì)譜系統(tǒng)，融智生物可提供結(jié)核分枝桿菌一體化高通量、高自動(dòng)化解決方案，包括對(duì)人結(jié)核分枝桿菌和牛結(jié)核分枝桿菌進(jìn)行種以及更高水平的鑒定，并能高效地為結(jié)核病診斷提供有價(jià)值的檢測(cè)結(jié)果。
融智生物QuanID微生物質(zhì)譜系統(tǒng)結(jié)核分枝桿菌鑒定流程圖
在前些天的推送中，我們與大家一起分享了微生物質(zhì)譜用于細(xì)菌鑒定的樣本前處理技巧（詳見：超詳細(xì)的微生物質(zhì)譜操作流程來了~碼??！），接下來我們將與大家分享微生物質(zhì)譜鑒定結(jié)核分枝桿菌的樣本前處理技巧：
微生物基質(zhì)試劑盒
分枝桿菌/諾卡菌試劑盒
純水
接種環(huán)：1μL, 10μL
微量移液器和吸頭：1000μL, 100μL, 2.5μL
離心管（EP 管）2.0mL
超聲波清洗器、渦旋混合器、轉(zhuǎn)速可達(dá)15000rpm的高速離心機(jī)、金屬浴
QuanID微生物質(zhì)譜系統(tǒng)不能直接檢測(cè)臨床標(biāo)本或混合培養(yǎng)物，待檢樣本必須是經(jīng)培養(yǎng)基分離培養(yǎng)后的純化菌落。
為了滿足鑒定準(zhǔn)確性的要求，須采用新鮮培養(yǎng)的菌株，分枝桿菌需培養(yǎng)至觀察到明顯菌落。
1) 使用移液器吸取250μL 純水至2.0mL EP管（分枝桿菌試劑盒中已加入硅珠的EP管），用接種環(huán)挑取適量菌于該EP管中。
2) 95℃金屬浴中加熱30min。
3) 從金屬浴中取出EP管，待溫度降低到50℃以下（手感不燙時(shí)），加入750μL R1試劑。
4) 在渦旋混合器上，使用最大速度，渦旋10min，以使分枝桿菌充分滅活。
5) 使用渦旋混合器混合5~10s，并立即使用移液器將懸濁液移入空的2.0mL EP管，注意不要移取任何硅珠，丟棄吸頭。
6) 15000rpm離心2min，棄去上清。再次離心，使用10μL移液器完全去除殘余的上清液，整個(gè)過程不應(yīng)觸碰沉淀。
7) 室溫下干燥沉淀數(shù)分鐘。
8) 加入試劑R2（5~20μL，根據(jù)沉淀量調(diào)整，要求試劑R2加入量沒過沉淀），充分混勻。
9) 加入與R2等體積的試劑R3，充分混勻。超聲5min。
10) 15000rpm離心2min。
11) 吸取1μL上清液，滴加到靶點(diǎn)上，室溫下自然干燥。
12) 1小時(shí)內(nèi)，在干燥后的樣本點(diǎn)上滴加1.5μL微生物基質(zhì)液，室溫下自然干燥，待測(cè)。
注意：?準(zhǔn)備好靶板后，須在2小時(shí)內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
